RIPA裂解液(强,无抑制剂)
时间:2017-11-21 阅读:2057
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中文名:RIPA裂解液(强,无抑制剂)
供应商:上海远慕
规格:100ml(其他规格请来电)
储存条件:—20℃
有效期:12个月
用途:裂解细胞提取总蛋白质,主要用于Western,免疫沉淀。
组成:主要由NP-40、deoxycholate、SDS组成。不含蛋白酶抑制剂。
RIPA裂解液(强,无抑制剂)即RIPA lysis buffer (strong, without inhibitors),主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,不含蛋白酶、磷酸酯酶等抑制剂。使用本裂解液时,用户可以根据具体用途自行添加特定抑制剂或者不添加抑制剂。
RIPA裂解液(强,无抑制剂)操作步骤:
1.开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。
2.使用时,根据裂解液的用量加入蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC),使其终浓度达到1×。
RIPA裂解液(强,无抑制剂)注意事项:
1.去除贴壁细胞的培养液后,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。
2.如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
3.如果细胞量较多,必需分装成50~100万细胞/离心管,然后再裂解。
4.如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈Vortex 使样品裂解充分。
5.溶解Leagene RIPA Lysis Buffer时,应尽量缩短溶解时间,避免有效成分失效。
6.裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。
7.细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或4℃进行。
8.如需添加蛋白酶等抑制剂,需自行准备。