β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP微板法)
时间:2017-11-16 阅读:1477
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP微板法)说明书
中文名:β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP微板法)
供应商:上海远慕
规格:50T
分类:酶类检测
保存:—20℃,避光
有效期:12个月
用途:检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中的β-N-乙酰葡萄糖苷酶活性。
适用范围:本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP微板法)检测原理:
在酸性条件下NAG可使底物对硝基酚-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷水解,释放出游离的对硝基酚(p-nitrophenol,PNP),在碱性条件下p-nitrophenol呈黄色产物,产物黄色越深,说明β-N-乙酰葡萄糖苷酶活性越高,反之则酶活性越低,通过酶标仪测定处吸光值,据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。
该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中的β-N-乙酰葡萄糖苷酶活性。
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β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP微板法)注意事项:
1.待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
2.建议每次测定时都做标准曲线,以使标准更准确,另外标准品需避免反复冻融。
3.如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应考虑根据比色杯的zui小检 测体积,尽量采用小体积的比色杯。
4.用窄带宽分光光度计,吸光度至1.0或酶活性达90U/L时仍为直线;用用窄带宽分光 光度计,吸光度至0.6或酶活性达60U/L时仍为直线。超出此范围应用生理盐水稀释样品后重新测定,结果乘以稀释倍数。
5.一支显色工作液配制后需当日使用完毕,因此请注意适当多准备一些样品一起检测。
6.尿β-N-乙酰葡萄糖苷酶活性以肌酐比值“NAG(U/gCr)”计算酶排出率,这样既不因 为尿浓缩或稀释的影响而改变,又可不需留24h尿
7.p-nitrophenol溶液对人体有害,反应终止液有腐蚀性,请小心操作。
8.如果希望进行酶活性的定量,进行酶反应时应计时,此时推荐采用孵育30min 或更长时间,以减小操作过程中的时间误差。
9.待测样品中酸性磷酸酶活性较低时,可适当延长孵育时间至30min。
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