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人白细胞介素-32(IL-32)Elisa试剂盒

时间:2014-11-30      阅读:83

人白细胞介素-32(IL-32)Elisa试剂盒试剂盒组成   
1  30倍浓缩洗涤液  20ml×1瓶  7  终止液  6ml×1 瓶 
2  酶标试剂  6ml×1瓶  8  标准品(240ng/L)  0.5ml×1 瓶 
3  酶标包被板  12 孔×8条  9  标准品稀释液  1.5ml×1 瓶 
4  样品稀释液  6ml×1瓶  10  说明书  1 份 
5  显色剂A 液  6ml×1瓶  11  封板膜  2 张    
6  显色剂B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 个 

人白细胞介素-32(IL-32)Elisa试剂盒操作步骤 
1.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。 
120 ng/L  5 号标准品  150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液 
60 ng/L  4 号标准品  150µl的5 号标准品加入150µl标准品稀释液 
30 ng/L  3 号标准品  150µl的4 号标准品加入150µl标准品稀释液 
15 ng/L  2 号标准品  150µl的3 号标准品加入150µl标准品稀释液 
7.5 ng/L  1 号标准品  150µl的2 号标准品加入150µl标准品稀释液 
 
 
2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样50µl, 待测样品孔中先加样品稀释液40µl,
然后再加待测样品10µl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 
3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。     
4.  配液:将20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水20 倍稀释后备用 
5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5次,拍干。 
6.  加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。   
7.  温育:操作同3。 
8.  洗涤:操作同5。 
9.  显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟. 
10.  终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。 
11.  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。 

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