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人白细胞介素-8(IL-8)Elisa试剂盒

时间:2014-11-28      阅读:94

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人白细胞介素-8(IL-8)Elisa试剂盒操作步骤 
1.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。 
1200ng/L  5 号标准品  150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液 
600 ng/L  4 号标准品  150µl的5 号标准品加入150µl标准品稀释液 
300 ng/L  3 号标准品  150µl的4 号标准品加入150µl标准品稀释液 
150 ng/L  2 号标准品  150µl的3 号标准品加入150µl标准品稀释液 
75 ng/L  1 号标准品  150µl的2 号标准品加入150µl标准品稀释液 
 
 
2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样50µl, 待测样品孔中先加样品稀释液40µl,
然后再加待测样品10µl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 
3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。     
4.  配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用 
5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5次,拍干。 
6.  加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。   
7.  温育:操作同3。 
8.  洗涤:操作同5。 
9.  显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟. 
10.  终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。 
11.  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。

人白细胞介素-8(IL-8)Elisa试剂盒保存条件及有效期 
1.试剂盒保存: ;2-8℃。 
2.有效期:6个月 

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