大鼠促胰液素(secretin)Elisa试剂盒
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102次大鼠促胰液素(secretin)Elisa试剂盒操作步骤
1.
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
160ng/L
5 号标准品
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
80ng/L
4 号标准品
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
40ng/L
3 号标准品
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
20ng/L
2 号标准品
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
10ng/L
1 号标准品
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2.
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,
然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.
温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.
配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6.
加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7.
温育:操作同 3。
8.
洗涤:操作同 5。
9.
显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
大鼠促胰液素(secretin)Elisa试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在 5 分钟内,如标本数量多,*使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
大于标准品孔*孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
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