常用人血清试剂和培养基的配制
时间:2014-02-28 阅读:764
常用人血清试剂和培养基的配制
(一) 反应剂 1、检查葡萄糖试剂 配方一 本尼迪克(Benedict)溶液 (1) 在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克*。 (2) 在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。 把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制)。 本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出0.15 ~0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 配方二 裴林(Fehling)溶液 (1)把34.5克硫酸铜溶于500毫升蒸馏水中。 (2)把125克氢氧化钾(钠)和173克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。 上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 2、检查淀粉的试剂 鲁哥氏(Lugol’s)溶液(碘液) 取6克*溶于20毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸馏水,
贮存在棕色试剂瓶内。 碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。 3、检查蛋白质的试剂 配方一 米伦(Millon)试剂 在60毫升浓硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。 在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。 配方二 双缩尿试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液。 在3毫升待测物中加入1毫升10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。 4、检查脂肪的试剂 苏丹Ⅲ(Ⅳ)酒精饱和溶液 取0.2克苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。 5、酸碱指示剂 配方一 *试剂和试纸 *试剂 取1克*,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。 酚态试纸 取1克*,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸馏水。把绿纸条放入*溶液中浸湿后,取出,放在无氨气影响处晾干。 酚泰试剂(试纸) pH值变色范围8.2~10,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。 配方二 红蓝石蕊试纸 取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分成两份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另1份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。 红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。 6、检查二氧化碳的试剂 检查二氧化碳的试剂,可用溴代*蓝溶液和石灰水。 配方一 溴代*蓝溶液 取0.1克溴代*蓝,溶解在100毫升蒸馏水里,滴入少量0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。 溴代*蓝溶液pH值变色范围是6.0(黄)~7.6(蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。 配方二 石灰水 在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。 如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。 7、检查细胞生活力的试剂 检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。人血清配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和1%甲基蓝溶液,这两种溶液各取1份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。 (二)分离液 1、肌细胞分离液