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常用人血清试剂和培养基的配制

时间:2014-02-28      阅读:764

常用人血清试剂和培养基的配制
(一) 反应剂  1、检查葡萄糖试剂   配方一 本尼迪克(Benedict)溶液   (1) 在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克*。  (2) 在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。   把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制)。   本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出0.15 ~0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。  配方二 裴林(Fehling)溶液   (1)把34.5克硫酸铜溶于500毫升蒸馏水中。   (2)把125克氢氧化钾(钠)和173克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。   上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。  2、检查淀粉的试剂   鲁哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)   取6克*溶于20毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸馏水,
贮存在棕色试剂瓶内。   碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。  3、检查蛋白质的试剂  配方一 米伦(Millon)试剂   在60毫升浓硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。   在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。  配方二 双缩尿试剂   分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液。   在3毫升待测物中加入1毫升10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。  4、检查脂肪的试剂  苏丹Ⅲ(Ⅳ)酒精饱和溶液   取0.2克苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。  5、酸碱指示剂  配方一 *试剂和试纸   *试剂 取1克*,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。   酚态试纸 取1克*,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸馏水。把绿纸条放入*溶液中浸湿后,取出,放在无氨气影响处晾干。   酚泰试剂(试纸) pH值变色范围8.2~10,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。  配方二 红蓝石蕊试纸   取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分成两份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另1份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。  红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。  6、检查二氧化碳的试剂   检查二氧化碳的试剂,可用溴代*蓝溶液和石灰水。  配方一 溴代*蓝溶液   取0.1克溴代*蓝,溶解在100毫升蒸馏水里,滴入少量0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。   溴代*蓝溶液pH值变色范围是6.0(黄)~7.6(蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。  配方二 石灰水   在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。  如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。  7、检查细胞生活力的试剂   检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。人血清配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和1%甲基蓝溶液,这两种溶液各取1份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。   (二)分离液   1、肌细胞分离液

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