TB1 Chemically Competent Cell 产品说明书

产品规格

TB1：                             10×100μl

pUC19（control vector）：10pg/μl           10μl

保存条件：-80℃

基因型

 F^– ara Δ(lac-proAB) rpsL (Str^r)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR

产品说明

TB1感受态细胞来源于JM 83，是JM 83 hsdR型，缺少 BL21 (DE3)菌株的 T7 RNA polymerase，适合NEB公司的pMAL 系列质粒原核蛋白表达(The pMAL  vectors use the E. coli RNA polymerase)，经pUC19质粒检测转化效率高达10⁸cfu/μg。

操作方法

1. 取100μl冰上融化的TB1感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

注意事项

1. 感受态细胞好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。