细胞核蛋白微量制备试剂盒
时间:2014-12-26 阅读:565
蛋白质系列
CAT#:RS990613-25
CAT#:RS990613-100
低温运输、4℃保存
细胞核蛋白微量制备试剂盒
Nuclear Protein Miniprep Kit
使用手册V1.0
产品及特
点
DNA 只存在于细胞核内,因此参与转录调节和DNA 复制的蛋白质主要存在于细
胞核中,要研究蛋白质与DNA 的相互作用,首先需要制备能够与DNA 作用的天然细
胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐,一次处理大量样品时
尤其不便,为此本公司开发了本产品,用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微
量提取,它具有下列特点:
1. 提取制备过程简便,只需要一小时。
2. 实验重复性好,尤其适合同时处理多个样品。
3. 可用于培养的动物细胞,也可以用于组织细胞。
4. 制备的核蛋白能保持天然活性,可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实
验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA 足迹图实验和甲
基化干扰实验酶活性测定等研究。
规格及成
分
成份25 次包装100 次包装
溶液A 10 mL 40 mL
溶液B 2.5 mL 10 mL
使用手册1 份1 份
运输及保
存
低温运输、4℃保存,有效期一年。
自备试剂无
使用方法1、对培养细胞:将覆盖率为55-65%的培养细胞用自备的*溶液(天泽产品编
号:90306)按标准的*法处理,然后刮到1.5mL 塑料离心管中,室温离心
30 秒,小心弃上清。
2、对悬浮细胞:直接将5×105-7 个的悬浮细胞转移到1.5mL 塑料离心管中,室温
离心30 秒,小心弃上清。
3、用1.5 mL 自备的PBS 缓冲液洗涤细胞沉淀一次,然后室温离心后弃上清。
4、在细胞沉淀中加入400 uL 溶液A,用手指弹管壁使沉淀悬浮起来。
5、冰浴10 分钟,涡旋激烈震荡10 秒混匀。
6、室温离心10 秒种,小心弃上清。
7、在沉淀中加入100 μL 溶液B,轻轻混匀使沉淀悬浮起来。
8、冰浴20 分钟。
9、4℃离心2 分钟,小心收集上清液(细胞核提取物),可立即用于后续的凝胶滞
后实验、BCA 法蛋白浓度测定或活性检测等实验,也可以分装后放-70℃长期保
存。
说明:本方法可以从1×106 的细胞中得到50-70ug 的核蛋白质。