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试剂盒名称:猪血管紧张素Ⅲ(AngⅢ)检测盒
Pig Angiotensin III (AngIII) ELISA
规格: 96T/48T
品牌:BIOFINE
种属:人ELISA试剂盒
检测波长:450nm
所需样本体积: 50-100ul
适用范围:仅供科研
保存及有效期:2-8℃,六个月,-20℃一年
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体猪血管紧张素Ⅲ(AngⅢ)检测盒含量。适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA中载体的材料很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。 ELISA载体的形状主要有三种:微量滴定板、小珠和小试管。以微量滴定板zui为常用,于EILSA的产品称为ELISA板,上标准的微量滴定板为8×12的96孔式。为便于作少量标本的检测,有制成8联孔条或12联孔条的,放入座架后,大小与标准ELISA板相同。ELISA板的特点是可以同时进行大量标本的检测,并可在特制的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量滴定板型的ELISA检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化极为有利。聚苯乙烯经射线照射后,其吸附性能特别是对免疫球蛋白的吸附性能增加,应用于双抗体夹心法可使固相上抗体量增多,但用于间接法测抗体时空白值较大。 良好的ELISA板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间、同一板各孔之间、同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大,因此,每一批号的ELISA板在使用前须事先检查其性能。常用的检查方法为:以一定浓度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗涤后每孔内加入适当稀释度的酶标抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后,分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各孔读数在吸光度0.8左右。计算全部读数的平均值。所有单个读数与全部读数的均数之差,应小于10%。 与聚苯乙烯类似的塑料是聚氯乙烯。作为ELISA固相载体,聚氯乙烯的特点为质软板薄,可剪割,价廉,但光洁度不如聚苯乙烯板,孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高。 为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣,可应用如下的试验:用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和阴性标本,将它们进行一系列稀释后,在不同的固相载体上按预定的ELISA操作步骤进行测定,然后比较结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果差别zui大,这种载体就是这一ELISA测定项目的zui合适的固相载体。 在ELISA中,用作固相载体的小珠一般为直径0.6cm的圆珠,表面经磨砂处理后吸附面积大大增加。ELISA板孔的吸附面积约为200mm2,小珠均为1000mm2,将近ELISA板孔的5倍。吸附面积的增大即意味着固相抗原或抗体量的增加。再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原决定簇或抗体结合位点的暴露面处于反应状态,因此珠式ELISA的反应往往更为灵敏。小珠的另一特点是更易于使洗涤*,使用特殊的洗涤器,使小珠在洗涤过程中滚动淋洗,其洗涤效果远较板孔的浸泡式为好。但由于磨砂工艺的难度较大,小珠的均一性较差。 小试管作为固相载体也有较大的吸附表面,而且标本的反应量也相应增加。板式及珠式ELISA的标本量一般为00-200ul,而小试管可根据需要加大反应体积,标本反应量的增加有助于试验敏感性的提高。小试管还可以当作比色杯,zui后直接放入分光光度计中比色。 也有应用聚苯乙烯胶乳或其他材料制成的微粒作为ELISA固相载体的。其优点是表面积*,反应在悬液中进行,其速率与液相反应近似。以含铁的磁性微粒作为ELISA固相载体,反应后用磁铁的吸引进行分离,洗涤方便,试剂盒一般均配以特殊仪器。
猪血管紧张素Ⅲ(AngⅢ)检测盒样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。24. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
猪血管紧张素Ⅲ(AngⅢ)检测盒
人上皮中性粒细胞激活肽78(ENA78)测定盒Human Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78) ELISA
猪B-细胞淋巴瘤因子9(Bcl9)检测盒Pig B-Cell CLL/Lymphoma 9 (Bcl9) ELISA
猪表面活性物质关联蛋白D(SPD)检测盒Pig Surfactant Associated Protein D (SPD) ELISA
人基质金属蛋白酶3(MMP3)测定盒Human Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) ELISA
猪阳离子氨基酸转运蛋白1(CAT1)检测盒Pig Cationic Amino Acid Transporter 1 (CAT1) ELISA
猪γ-氨基丁酸A受体α2(γABRα2)检测盒Pig Gamma-Aminobutyric Acid A Receptor Alpha 2 (gABRa2) ELISA
人血小板衍生生长因子受体样蛋白(PDGFRL)测定盒Human Plaet Derived Growth Factor Receptor Like Protein (PDGFRL) ELISA
猪补体C3转化酶(C3c)检测盒Pig Complement C3 Convertase (C3c) ELISA
人血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)测定盒Human Angiotensin I (AngI) ELISA
人硫酸酯酶1(SULF1)测定盒Human Sulfatase 1 (SULF1) ELISA
人干扰素调节因子2结合蛋白1(IRF2BP1)测定盒Human Interferon Regulatory Factor 2 Binding Protein 1(IRF2BP1) ELISA
人生长因子受体结合蛋白10(Grb10)测定盒Human Growth Factor Receptor Bound Protein 10 (Grb10) ELISA