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人肾透明细胞腺癌;786-0复苏

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上海抚生实业有限公司

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elisa试剂盒,ATCC细胞,标准品,培养基

  上海抚生实业有限公司成立于2012年,经过数年的努力已迅速成为集科研和为一体的专业化生物工程公司。特别是ELISA,代测,技术服务这一产品已使上海抚生成为中国公司。

公司产品涵盖ELISA、细胞培养,各种生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、培养基、自产实验室耗材、小型仪器等。此外、上海抚生还代理了美国药典标准品,中检所标准品,sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等国外各类公司的产品。

上海抚生将进一步加强人才经营、产品经营,不断提升企业的核心竟争力,实现具有产业体系、知识化创业团队的化的公司,服务于生命科学领域,迎接世界经济一体化所带来的机遇与挑战。

详细信息

产品名称生长特性发货地货期
人肾透明细胞腺癌;786-0复苏贴壁生长上海3-5天

细胞名称  人肾透明细胞腺癌;786-0复苏
形态特性   上皮样细胞
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞系来源于一个原发性透明细胞癌。 此细胞有微绒毛和桥粒,能在软琼脂是生长。 此细胞生成的一个PTH样的多肽与乳癌和肺癌中的肽相似。 这个多肽的N端与PTH相似,活性与PTH相似,分子量为6000道尔顿 
培养条件   RPMI 1640(含2mM L-glutamine) (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法   1:3传代;3-4天一次
传代情况  PN2
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  荧光法(-)
STR   Amelogenin:XY;CSF1PO:10;D13S317: 8;D16S539: 12;D18S51: 13,14;D19S433: 14,15;D21S11: 29, 30;D2S1338: 17, 18;D3S1358: 16;D5S818:9;D7S820: 11,12;D8S1179:12,13;FGA: 24;TH01: 6, 9.3;THOX: 8,11;vWA:15,17;
同工酶  无
染色体   82-88
使用权限  A类

来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
aspase-1 p20    天冬氨酸-*特异蛋白酶家族抗体
Calneuron 1    钙营养蛋白1/钙结合蛋白8抗体
CABP5    钙结合蛋白5/3抗体
SLC7A5    CD98轻链抗体
CLPS    胰辅脂酶抗体
C17orf104    17号染色体开放阅读框104抗体
CART    卡因和调节转录蛋白抗体
CCN1    富半*肝素结合蛋白61抗体
C2orf65    2号染色体开放阅读框65抗体
CTNNBL1    β连环蛋白样蛋白1抗体CM-R021    大鼠胰腺上皮细胞*培养基    100mL
CM-R022    大鼠甲状腺上皮细胞*培养基    100mL
CM-R023    大鼠淋巴管内皮细胞*培养基    100mL
CM-R024    大鼠淋巴成纤维细胞*培养基    100mL
CM-R025    大鼠外周血白细胞*培养基    100mL
CM-R026    大鼠骨髓基质细胞*培养基    100mL
CM-R027    大鼠食管上皮细胞*培养基    100mL
CM-R028    大鼠食管平滑肌细胞*培养基    100mL
CM-R029    大鼠肠平滑肌细胞*培养基    100mL
CM-R030    大鼠肠粘膜上皮细胞*培养基    100mL
CM-R031    大鼠肠动脉内皮细胞*培养基    100mL
CM-R032    大鼠肠静脉内皮细胞*培养基    100mL

 

 

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