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生产厂家产品名称:双调蛋白试剂盒
实验类型:双抗体夹心法
产品品牌:晶抗生物
保存温度:2-8 ℃
产品规格:96T/48T
产品包装:液体盒装
使用范围:仅供科研使用,不得用于临床
产品用途:用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性
操作步骤:
1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5、每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9、在450nm波长处测定各孔的OD值。
操作注意事项:
1、试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6、底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7、加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
一般来讲,96T能检测90个样本,48T能检测42个样本,这里面需要用标样来做标准曲线,所以各位需要做实验的老师们,请在购买ELISA试剂盒的时候注意,需要做多少个样本,在决定买多大规格的试剂盒,以免做实验时出现试剂盒不够用或者浪费!
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