WISH细胞培养 WISH细胞 人羊膜细胞（WISH细胞株）

WISH细胞 人羊膜细胞（WISH细胞株）

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小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞NG108-15细胞

人舌鳞癌Tca8113-P60细胞、人舌鳞癌Tca8113-P160细胞

人乳腺癌BC－020细胞、人乳腺癌BC－021细胞

WISH细胞 人羊膜细胞（WISH细胞株）

通派生物细胞库提供（卵清蛋白诱发的哮喘模型）：

过敏性哮喘是2型T辅助细胞（Th2）驱动的炎性疾病。Th2细胞因子的重要性已在众多小鼠研究中得到验证。具体来说，Th2淋巴细胞可以产生各种促炎性细胞因子，这些因子在过敏性哮喘的发展中具有重要作用，包括白介素（IL）-4，IL-5和IL-13。此外，它们还可以诱导过敏原特异性免疫球蛋白（Ig）E，趋化因子和嗜酸性粒细胞的分泌以及粘液的产生。

OVA是蛋清中的主要蛋白质，它不是机体固有的过敏源，因此需要在佐剂（通常为氢氧化_铝）的联合下进行全身注射，以诱导小鼠Th2致敏。通常，在造模时向小鼠腹膜内注射与铝（铝）复合的卵清蛋白（OVA）。随后，致敏的小鼠受到OVA的攻击，导致小鼠出现括嗜酸性粒细胞炎症，Th2细胞因子产生，血清IgE升高和气道反应过度等哮喘特征。

血清生长测试步骤：

1）： 以a-MEM with 10 % FBS (已测试过) 培养MDCK 细胞于T75 flask 至80% confluency；

2）：以trypsin-EDTA 处理细胞，离心后，加入适量不加血清之a-MEM 制成细胞悬浮液，并测细胞浓度。以不加血清之a-MEM 稀释细胞浓度为1×102活细胞数/ ml。

3）：将1 ml 细胞悬浮液接种入6-well plate 中，并另加入1 ml 含不同浓度的血清(20 % , 10 % , 4 % , 2 % , 1 % , 0.4 %) 的a-MEM，使血清最终浓度为10% , 5 % , 2 % , 1 % , 0.5 % , 0.2 %。用已测试过之血清同时进行对照组试验。

4）：37℃，5% CO2 培养箱培养5-7天，期间不需更换培养基，待细胞群落大到可以肉眼观察，而群落间不互相接触即可。

5）：去除培养基，加入1 ml Carnoy’s 固定液(甲醇:冰醋酸﹦ 3:1)，室温下静置10 min。

6）：去除固定液，水洗二次，加入1 ml 10 % Giemsa solution，，室温下静置染色2-3 min。

7）：去除染液，水洗二次，以肉眼计数群落数；

8）：计算SPE ( Serum Plating Efficiency )：SPE = ( no. of colonies / well ) / 100 x 100 %

9）：计算RPE(Relative Plating Efficiency)：SPE = [ total colonies of six well (test) / Total colonies of six well (control) ] x100 %

更多细胞操作方法、注意事项可咨询通派细胞库管理员；

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