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产品中文名:人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA试剂盒
别名:人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA Kit
规格:96T/48T
保存:2-8℃
样本:血清/组织/尿液
标记物:酶标板,试剂,标准品等。
样本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
Elisa试剂盒特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。
人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA免疫试剂盒技术原理:
(1)抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2)结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3)酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4)受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5)此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6)加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA试剂盒分析过程中的注意事项:
样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本zui终的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的*性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。
常见加样方式
A、吸一打二
B、吸二打一
在实际操作过程中,提倡用“吸二打一”用这种方式,有如下几个好处:
a、加样过程中在板孔内不出现或者很少出现气泡
b、提高加样速度,缩短前后样本反应的时间差。
在加样的过程中还应细心注意避免出现下列现象:
A、加样的过程中漏加或者重加;
B、加样的过程中忘记更换吸头;
C、样本的重加或者漏加;
D、忘记记录样本的加样顺序。
zui适比例
在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物(沉淀)的量。曲线的高峰部分是抗原抗体比例zui合适的范围,称为等价带。在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象。抗体过量称为前带,抗原地过量称为后带。在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。
人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA Kit样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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