杜氏磷酸缓冲液

基础杜氏磷酸缓冲液

绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有*，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非*选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*，据报道也有神经毒效应。

杜氏磷酸缓冲液 制备方法：

1. 培养同源细胞（未克隆前时的同一细胞）至半汇合状态时，更换一次培养液，再继续培养24~48小时后，吸出所有培养液。

2. 离心：3000~4000/分离心10分钟，吸取上清液。

3. 滤过：再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤，低温冻存贮备用；用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。

生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求，若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分，将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路，一是让培养细胞提供自己的营养因子，二是在 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长，所需的生长因子便会积累到可观的数值，尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求，可保持培养基在一段时间里不作任何变动，以使营养（生长）因子积累，而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是，这种对营养（生长）因子自身倚赖性亦有弊端，因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖，某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外，这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基（经过了高密度培养）进行，或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。

满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过，只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。

相关产品如下：hz-1189    A-431(表皮癌细胞)
hz-1190    HeLa 229(宫颈癌细胞)
hz-1191    CBRH-7919(肝癌细胞)
hz-1192    RH-35(肝癌细胞)
hz-1193    SHZ-88(乳腺癌细胞)
hz-1194    MLTC-1(睾丸间质细胞瘤细胞)
hz-1195    L6565(小鼠L6565白血病克隆细胞系)
hz-1196    F9(畸胎瘤细胞)
hz-1197    LLC Lewis(肺癌细胞)
hz-1198    C127(乳腺肿瘤细胞)
hz-1199    MFC(胃癌细胞)
hz-1200    B16(黑色素瘤细胞)
hz-1201    B16(黑色素瘤细胞)
hz-1202    P815(肥大细胞瘤细胞)
hz-1203    S-180(腹水瘤细胞)
hz-1204    RM-1(前列腺癌细胞)
hz-1205    SAC-IIC3(腹水瘤细胞)
hz-1206    NG108-15 [ 108CC15 ](小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞)
hz-1207    SAC-IIB2(腹水瘤细胞)
hz-1208    Hepa 1-6(肝癌细胞)
hz-1209    P388D1(淋巴瘤细胞)
hz-1210    P3X63Ag8.653(骨髓瘤细胞)
hz-1211    YAC-1(淋巴瘤细胞)
hz-1212    P3X63Ag8(骨髓瘤细胞)
hz-1213    EL4. IL-2(淋巴瘤细胞)
hz-1214    SP2/0(骨髓瘤细胞)
hz-1215    EL4(淋巴瘤细胞)
hz-1216    P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1](骨髓瘤细胞)
hz-1217    PIEC(猪髋动脉内皮细胞)
hz-1218    CRFK(猫肾细胞)
hz-1219    EBTr (NBL-4)(牛胚气管细胞)