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曙红*琼脂培养基(EMB)
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生产厂家上海沪震实业有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。厂房严格按照GMP标准设计建造,拥有*的生产设备和检测仪器。主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国外,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒,抗体,标准品,微生物培养基等生物科技实验需求。
上海沪震实业有限公司 先后与天津中医学院、上海中医药大学,上海市公共临床中心,上海复旦大学、上海交通大学医学院、北京动物园,上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
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基础曙红*琼脂培养基(EMB)
绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有*,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非*选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*,据报道也有神经毒效应。
曙红*琼脂培养基(EMB)制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在曙红*琼脂培养基(EMB)中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
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SHG-44 脑恶性胶质瘤细胞
NEI-H209 小细胞肺癌细胞
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NCI-H345 小细胞肺癌细胞
M17 神经母细胞瘤细胞
NCI-H446 小细胞肺癌细胞
LAN-5 神经母细胞瘤细胞
Bcap-37 乳腺髓样癌细胞
LAN-6 神经母细胞瘤细胞
BT474 乳腺导管瘤细胞
SK-N-SH 神经母细胞瘤细胞
MDA-MB-157 乳腺癌细胞
SH-SY5Y 神经母细胞瘤细胞
MDA-MB-231 乳腺导管癌细胞
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MDA-MB-453 乳腺癌细胞
SF17 脑瘤细胞
T47D 乳腺导管癌细胞
SF763 脑瘤细胞
ZR-75-1 乳腺导管癌细胞
SF767 脑瘤细胞
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