TSA+*酶

基础TSA+*酶

绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有*，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非*选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*，据报道也有神经毒效应。

TSA+*酶制备方法：

1. 培养同源细胞（未克隆前时的同一细胞）至半汇合状态时，更换一次培养液，再继续培养24~48小时后，吸出所有培养液。

2. 离心：3000~4000/分离心10分钟，吸取上清液。

3. 滤过：再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤，低温冻存贮备用；用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。

生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求，若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分，将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路，一是让培养细胞提供自己的营养因子，二是在TSA+*酶中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长，所需的生长因子便会积累到可观的数值，尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求，可保持培养基在一段时间里不作任何变动，以使营养（生长）因子积累，而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是，这种对营养（生长）因子自身倚赖性亦有弊端，因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖，某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外，这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基（经过了高密度培养）进行，或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。

满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过，只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。

TSA+*酶相关产品如下：hz1076    盐*增菌液（SC）    250g    用于沙门氏菌选择性增菌培养（GB，SN标准）
    Selenite Cystine Broth        
hz1077    盐增菌液（SF）    250g    用于增殖标本中的沙门氏菌检测
    Selenite Enrichment Medium        
hz1078    四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB）    250g    用于沙门氏菌选择性增菌培养，需加入煌绿和碘液（GB，SN标准）
    Tetrathionate Broth Base        
hz1080    胆硫乳琼脂（DHL）    250g    肠道菌选择性培养基，特别是沙门氏菌的选择性分离（GB，SN标准）
    Deoybcholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar        
hz1081    三糖铁琼脂（TSI）    250g    生化培养基，用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选（GB，SN标准）
    Triple Sugar Iron Agar        
hz1082    SS琼脂    250g    用于沙门氏菌，志贺氏菌的选择性分离培养（GB标准）
    Salmonella Shigella Agar        
hz1083    亚硫酸铋琼脂（yb）    250g    用于沙门氏菌的选择性分离（GB，SN标准）
    Bismuth Sulfite Agar        
hz1084    氯化镁孔雀绿肉汤（MM，RVMedium）    250g    用于沙门氏菌的选择性增菌培养（GB标准）
    Rappaport-Vassiliadis Mdeium        
hz1085    HE琼脂（HE）    250g    用于沙门氏菌的选择性分离培养（GB标准）
    Hekton Enteric Agar        
hz1086    尿素酶琼脂基础    250g    生化培养基，用于细菌脲酶检测（GB，SN标准）
    Urease Agar Base        
hz1087    V-P半固体琼脂    250g    生化培养基，用于细菌V-P试验（SN标准）
    Voges-Proskauer Semisolid Agar        
hz1088    吲哚培养基    10g    生化培养基，用于细菌靛基质试验，亦称*肉汤（SN标准）
    Indole Medium        
hz1089    赖氨酸脱羧酶培养基    10g    生化培养基，赖氨酸脱羧酶试验（GB，SN标准）
    Lysine-decarboyblase Test Broth        
hz1090    硝酸盐培养基基础(无)     250g    生化培养基，用于细菌硝酸盐还原试验，KCN抑制（需另加入）试验（GB，SN标准）
    Nitrate(KCN) Broth Base(KCN-free)        
hz1091    丙二酸钠培养基    10g    生化培养基，用于细菌丙二酸盐利用试验（GB，SN标准）
    Malonate Broth        
hz1092    卫矛醇半固体琼脂    10g    生化培养基，用于细菌卫矛醇发酵试验（SN标准）
    Dulcitol Semisolid Agar