"Insulin Receptor（ISR）??胰岛素受体（抗原）

蛋白质及多肽合成

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相关知识>>>>>

多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：
　　1、制备抗原。 　
　2、选择实验动物。
　　3、动物免疫。 　
　4、试取血进行测试，看看是否成功免疫。
　　5、如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。
　　6、纯化出抗体。 　
　7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
　　标记抗体：
　 　抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体，是免疫电镜样品制备的一种方法，用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。
蛋白质与多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽，它们的分子量低于10，000Da（Dalton，道尔顿），能透过半透膜，不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽（小分子肽）；10~50个氨基酸组成的肽称为多肽；由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质。
蛋白质：生物体中广泛存在的一类生物大分子，由核酸编码的α氨基酸之间通过α氨基和α羧基形成的肽键连接而成的肽链，经翻译后加工而生成的具有特定立体结构的、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链，再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合合而成的高分子化合物。
就是：都是由20种基本氨基酸通过肽键连接而成的。
多肽与蛋白质的区别：
　　蛋白质的结构层次可简写为：C、H、O、N等元素→氨基酸→多肽（肽链）→蛋白质。多肽与蛋白质是不同的两个层次，区别如下：
　　①多肽和蛋白质的结构有差异。多肽仅仅是蛋白质的初级结构形式，而蛋白质具有一定的空间结构。蛋白质是由多肽和其他物质结合而成的，一个蛋白质分子可由一条肽链组成（如高等动物的细胞色素c是由104个氨基酸残基的一条肽链组成），也可由多条肽链通过一定的化学键（肯定不是肽键，如二硫键、氢键等）连接而成（如胰岛素由2条肽链组成、胰凝乳蛋白酶是由3条肽链组成、血红蛋白分子由4条肽链组成、免疫球蛋白分子由4条肽链组成等）。
　　②多肽与蛋白质的功能有差异。多肽往往是无生物活性，而蛋白质是具有生物活性的。多肽一般无活性（如蛋白质在胃、小肠中经消化产生的多肽），少数有活性（如抗利尿激素就是多肽类激素），与蛋白质相比，多肽的分子量较小，没有空间结构，一般无活性；蛋白质的分子量较大，有空间结构，有活性（变性后活性下降或消失，活性消失叫做失活）
　　因此，一条刚从核糖体中合成的多肽链实际上不能称为蛋白质。
多肽合成：
是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法*的优点，从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种：固相合成和液相多肽合成。
单克隆抗体和多克隆抗体有什么区别?
抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇，因而使机体产生好几种不同的抗体，zui终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系，纯系的英文为Clone，音译就是克隆。
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就象导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。
按理化性质和生物学功能分类：
　　按理化性质和生物学功能，可将其分为IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五类。
　　IgM抗体是免疫应答中首先分泌的抗体。它们在与抗原结合后启动补体的级联反应。它们还把入侵者相互连接起来，聚成一堆便于巨噬细胞的吞噬；
　 IgG抗体激活补体，中和多种毒素。IgG持续的时间长，是*能在母亲妊娠期穿过胎盘保护胎儿的抗体。他们还从乳腺分泌进入初乳，使新生儿得到保护；
　　IgA抗体进入身体的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。还可以通过母乳的初乳把这种抗体输送到新生儿的消化道黏膜中，是在母乳中含量zui多，zui为重要的一类抗体；
　　IgE抗体的尾部与嗜碱细胞、肥大细胞的细胞膜结合。当抗体与抗原结合后，嗜碱细胞与肥大细胞释放组织胺一类物质促进炎症的发展。这也是引发速发型过敏反应的抗体；
　　IgD抗体的作用还不太清楚。它们主要出现在成熟的B淋巴细胞表面上，可能与B细胞的分化有关。
（IgD于1995年从人骨髓瘤蛋白中发现，分子量为175kD，主要由扁桃体、脾等处浆细胞产生，人血清中IgD浓度为3～40μg/ml,不到血清总Ig的1%，在个体发育中合成较晚。IgD铰链区很长，且对蛋白酶水解敏感，因此IgD半衰期很短，仅2.8天。血清中IgD确切的免疫功能尚不清楚。在B细胞分化到成熟B细胞阶段，除了表达SmIgD，抗原刺激后表现为免疫耐受。成熟B细胞活化后或者活化后或者变成记忆B细胞时，SmIgD逐渐消失。）
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