兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

9246 生长关联蛋白43(GAP43)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Associated Protein 43 (GAP43) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9247 肌腱蛋白R(TNR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin R (TNR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9248 微管关联蛋白2(MAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein 2 (MAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9249 黑色素瘤关联ME20(ME20M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Melanoma Associated ME20 (ME20M) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9250 套膜蛋白(iNV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Involucrin (iNV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9251 *脱羧酶(ODC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ornithine Decarboxylase (ODC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9252 粘着斑激酶(FAK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Focal Adhesion Kinase (FAK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9253 微管关联蛋白6(MAP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein 6 (MAP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9254 弹性蛋白(ELN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastin (ELN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9255 晚期糖基化终末产物(AGE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Advanced Glycation End Product (AGE) 48T/96T General
9256 芳香烃受体(AhR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9257 花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonate-5-Lipoxygenase (ALOX5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9258 花生四烯酸-15-脂加氧酶B(ALOX15B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase, Type B (ALOX15B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9259 细胞外信号调节激酶1(ERK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Extracellular Signal Regulated Kinase 1 (ERK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9260 凋亡信号调节激酶I(ASK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (ASK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9261 酸性神经鞘磷脂酶(ASM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acid Sphingomyelinase (ASM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9262 毛细血管扩张性共济失调突变因子(ATM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ataxia angiectasia Mutated (ATM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9263 *加压素受体1A(AVPR1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arginine Vasopressin Receptor 1A (AVPR1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9264 原钙黏素1(PCDH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protocadherin 1 (PCDH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9265 乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Breast Cancer Susceptibility Protein 2 (BRCA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9266 葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucokinase Regulatory Protein (GKRP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9267 Bcl2关联X蛋白(Bax)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bcl2 Associated X Protein (Bax) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9268 B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9269 凋亡相关因子(FAS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis (FAS) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9270 血管内皮钙黏蛋白(CDH5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin 5 (CDH5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9271 血管内皮钙黏蛋白(CDH5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin 5 (CDH5) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9272 血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 (VEGFR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9273 血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 (VEGFR2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9274 肝配蛋白A受体1(EPHA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 1 (EPHA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9275 肝配蛋白A受体1(EPHA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 1 (EPHA1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9276 乳酸脱氢酶A(LDHA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lactate Dehydrogenase A (LDHA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9277 转醛缩酶(TALDO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transaldolase (TALDO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9278 鳞状细胞癌抗原1(SCCA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Squamous Cell Carcinoma Antigen 1 (SCCA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9279 防御素β1(DEFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9280 小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C (SNRPC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9281 γ-谷氨酰转移酶1(γGT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gamma-Glutamyltransferase 1 (gGT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9282 乳腺癌易感蛋白1(BRCA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Breast Cancer Susceptibility Protein 1 (BRCA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9283 间羟肾上腺素(MN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metanephrine (MN) 48T/96T General
9284 垂草扁桃酸(VMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vanillylmandelic Acid (VMA) 48T/96T 兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒General
9285 中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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