mf2372 酵母菌化学感受态细胞 表达分析
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上海懋康生物科技有限公司是一家致力于生命科学和生物技术领域的高科技企业。公司由在国内科研试剂领域有着十几年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成，专门从事以抗体、细胞因子、免疫检测试剂盒等免疫学产品为主的生物试剂的研发与销售。公司代理40余家欧美著名生物技术公司的相关产品，能为生命科学多研究领域的广大科研人员提供数万种抗体、数千种蛋白以及相关检测试剂盒等。
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
详细信息
INVSc1 Chemically Competent Cell
酵母菌化学感受态细胞
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
INVSc1 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | MF2372-1000UL | 10×100μl | 320 |
MF2372-5000UL | 50×100μl | 1360 |
产品包装
组分编号 | 组分名称 | 保存 | 货号（规格） | |
MF2372-1000UL | MF2372-5000UL | |||
MF2372-A | INVSc1 Chemically Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2372-B | pYES2 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2372-C | Carrier DNA (10μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2372-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
保存与运输方法
保存：其中感受态细胞按标签注明置于-80℃保存，三个月有效。其他组分按照标签注明保存，一年有效。
运输：干冰运输。
产品描述
INVSc1菌株是一种快速生长的酿酒酵母菌，是一款非常理想的重组蛋白表达菌株，但因孢子生成能力弱，不适合用于基因分析研究。配套的质粒有：pYES3/CT、pYC 2、pYES2系列。当这些质粒（比如：pYES2）与INVSc1菌配套使用，会激活pYES2质粒上的GAL1启动子的转录，进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1是二倍体细胞，是组氨suan、亮氨suan、色氨suan、尿mi啶缺陷型菌株，可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA，可用SD-URA平板进行筛选。
本品为经特殊工艺制备的INVSc1酵母菌化学感受态细胞，用pYES2质粒检测转化效率＞104 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。
基因型
MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
注意事项
1） 最好在冰上融化感受态细胞。
2） 转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。
3） INVSc1对高温敏感，最适生长温度为27-30℃，一旦高于31℃，生长速度和转化率都呈指数下降。
4） 酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢，营养缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板于29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板于29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆；涂SD双缺平板于29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆；涂SD三缺或四缺平板于29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆；
5） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1） 取100 µl冰上融化的INVSc1化学感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，预处理的Carrier DNA（95-100℃水浴3 min或95℃金属浴5min，快速冰浴3min。重复一次。处理完快速插入冰中，待用。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用枪吹打几次充分混匀，30℃水浴30 min（在15min时翻转6-8次混匀）。
2） 之后将管子放42℃水浴15 min（在7.5min时翻转6-8次混匀）。
3） 5000 rpm离心40s弃上清，用400 µl ddH2O重悬沉淀，离心30s弃上清。
4） 用50 µl ddH2O重悬，涂板，放入29℃培养48-96 h。
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MS6368-5L | SD/-Ura with Agar酵母缺陷型培养基（琼脂） | 10×0.5 L |
MS6319-10G | DO Supplement -Ura | 10g |
MS6305-100G | YNB Without Amino Acids酵母氮源基础（无氨基酸） | 100g |
附录I培养基配制
一、质粒筛选用培养基：SD/-Ura培养基配制（1L）
酵母氮源基础（YNB） 6.7g
葡萄糖 20g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 适量（详见说明书）
补水到1L，用1M NaOH调pH至5.8。
琼脂粉（Agar） 20g（仅限固体培养基）
121℃，15min高压灭菌。
二、蛋白诱导用培养基：SGR/-Ura培养基配制（1L）
酵母氮源基础（YNB） 6.7g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 适量（详见说明书）
补水到800 mL，用1M NaOH调pH至5.8。
121℃，15min高压灭菌。
待培养基温度冷却到55℃左右，加入已过滤的碳源：100ml 20%半乳糖，100m 10%棉子糖。混匀即可。
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
