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本试剂盒采用亲和素-化破伤风杆菌纯化抗原预包被板 EISA 原理,检测人血清中存在的破伤风 IgG 抗体,并配以酶标记抗人 IgG 单克隆抗体作为标记物。加入底物 TMB 显色后终止反应,在450nm 波长测各孔 O.D 值,O.D 值的大小与待检抗体含量成正比。系统(biotin-avidimsystem)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。破伤风抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。2、标本稀释:用标本稀释液以 1:101(2u 标本-200ul标本稀释液)稀释标本。于反应板中加已稀释待检标本及阴阳性对照(100ul)各一孔,设空白对照一孔(加 100u 标本稀释液)轻拍混匀。37℃温育30分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。
加酶结合物:每孔2滴,混匀后置 37℃温育 30分钟。同上法洗涤3次并拍干
显色:每孔加显色剂 A、B 各一滴,轻拍混匀(或震荡器混匀)后置 37℃10 分钟
[结果判断破伤风抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
1.目测:在白色背景下观察各孔显色情况,蓝色者为阳性,无色者为阴性。
酶标仪测定:每孔加终止液一滴,混匀后在 450nm下测定各孔 O.D 值。
① S/N=标本 O.D 值/ 阴性对照 O.D 值。
S/N≥2.1 为阳性;
1.5≤S/N<2.1为可疑标本:S/N<1.5 为阴性。
阴性对照(NC)小于 0.10 时以 0.10 计,大于0.1 小于 0.21 时以实际 0.D 值计算 ;若大于0.21 时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。