疾控推荐 NOVABIOS乙脑病毒IgM抗体ELISA试剂盒
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详细信息
NOVABIOS乙脑病毒IgM抗体ELISA试剂盒
(我司还提供疟疾、登革热、基孔肯雅热、克维锥虫、RK39和黄热病等检测试剂盒，咨询）Inbios流行性乙型脑炎病毒ELISA检测试剂盒
【保存条件】
为确保本试剂盒的稳定性和有效性，建议将试剂盒存放在2°C至8°C的冷藏条件下，避免阳光直射和高温。同时，请确保试剂盒在有效期内使用。
【预期用途】
NOVABIOS乙脑病毒IgM抗体ELISA试剂盒是一种用于定性检测人血清、血浆或脑脊液中乙型脑炎病毒抗体的试剂盒。它采用酶联免疫吸附试验（ELISA）的原理，通过特定的抗原与抗体反应来检测乙型脑炎病毒的抗体。
本试剂盒包含以下组件：
酶标板：预包被乙型脑炎病毒抗原的酶标板。
酶标记抗体：与乙型脑炎病毒抗体特异性结合的酶标记抗体。
酶底物：与酶标记抗体反应产生颜色变化的底物。
样本稀释液：用于稀释样本的稀释液。
洗涤液：用于洗涤酶标板的洗涤液。
终止液：用于终止酶标记抗体与底物的反应。
【实验步骤】
使用前将所有试剂试剂和标本送到室温（25℃）。使用前温和反转混合试剂和样品。
（注：所有血清，包括实验性的血清不能反复解冻和冷冻。长期储存的血清应进一步分装和存储在-70℃。）
试剂准备：
•1X洗涤缓冲液的制备
使用生物或高级水将10X洗涤缓冲液稀释至1倍。 为了制备1X洗涤缓冲溶液，将120ml 10X洗涤缓冲液与1080ml蒸馏水（或去离子水）混合并冲洗出任何晶体。旋转至充分混合，所有晶体溶解。稀释至1倍后，在室温下储存长达4个月。 使用前检查污染情况。
•微量滴定孔板
选择测定所需的涂层孔数。 剩余的未使用的孔应该被覆盖并迅速放回袋中，并储存在2-8°C直到准备使用或到期。
测定程序:
1.待测试的阳性、阴性和未知血清应一式两份进行检测。 有关此过程的说明，请参阅本节末尾的流程图。 可以在一个96孔板上重复测试二十二个试样。
2.标记要使用的微量滴定条。
3.使用提供的样品稀释液稀释测试血清，并控制到1/100。使用小型聚丙烯管用于这些稀释液和至少4μL血清和阳性和阴性对照。例如：4μL血清加396μL用于乙脑检测IgM的样品稀释缓冲液进行1/100稀释。
4.根据需要，通过移液器将50μL/孔的1/100稀释的测试血清、乙脑检测阴性对照和乙脑检测IgM阳性对照适用于平板。二十二份测试血清样品的一个示例性布置如下所示。
5.将盖板或石膏膜放在孔的开口表面上，板的底部不要覆盖。
注意：这是为了确保温度分布从底部和侧面均匀分布在所有孔中; 一旦顶部被密封以阻止蒸发，多余的石蜡膜可以剪掉。
6.将板放在37℃的水浴培养箱中孵育1个小时。可以使用培养箱底部的水盘来实现加湿。
7.孵育后，使用1x洗涤缓冲液用自动洗板机洗板6次。 在每个洗涤周期中每孔使用300μl。
8.省略
9.使用石膏膜在开孔面上覆盖板，因此不应覆盖板的底部（参见步骤5）。
10..将板在37℃的水浴培养箱中孵育1小时（参见步骤6）。
11.孵育后，使用1x洗涤缓冲液用自动洗板机洗板6次。在每个洗涤周期中每孔使用300μl。
12.通过移液器向所有孔中加入50μL/孔的酶-HRP共轭物。
13.将盖板放在孔的开口表面上，使板的底部不被覆盖。（参见步骤5）。
14.将板放在37℃加湿的培养箱中孵育1小时（参见步骤6）。
15.孵育后，使用1x洗涤缓冲液用自动洗板机洗板6次。
16.通过移液器向所有孔中加入150μl/孔的EnWash。
17.将板在室温下孵育5分钟，不要盖住板。
注意：不要将板叠在一起。 它们应该分散为单层。 这对均匀的温度分布非常重要。 不要使用二氧化碳或其他气体。 不要将板与任何湿物质如湿纸巾等接触。
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