小鼠子宫内膜干细胞

细胞简介：

小鼠子宫内膜分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫内膜即黏膜，由上皮（属单层柱状上皮，有分泌细胞和纤毛细胞二种）和固有膜（由结缔组织构成，其内有大量的星形细胞，称为基质细胞）组成，子宫内膜可分为浅表的功能膜和深部的基底层，功能层较厚，约占内膜厚度的4/5；基底层较薄较致密，约占1/5，功能层可剥脱，而基底层剥脱。子宫内膜构成雌性哺乳动物子宫壁的内层，位于子宫腔面，在动物生殖生理活动中占有重要地位。子宫和子宫内膜是维持雌性动物生理功能和生育能力的重要器官，子宫内膜的再生修复是子宫的重要生理功能。间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）来源于胚胎时期的中胚层组织，具有很强的自我复制和多向分化潜能，具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力，运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景，目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。体外培养的子宫内膜干细胞细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

方法简介：

实验室分离的小鼠子宫内膜干采用胶原酶消化法、低密度稀释克隆制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠子宫内膜经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传2-3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠子宫内膜干体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠蛋酸酶(PP)试剂盒 ，英文名： PP ELISA Kit

Porcine vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒

病毒通用型核酸试剂盒(荧光PCR法) 48T

CLIAKitforLptn/LTN/XCL1(Humanlymphotactin)ELISAKit人淋巴细胞趋化因子

通用免疫化学封闭溶液100毫升

ELISAKitMYO/MB鸡肌红蛋白

血小板衍化生长因子-AB   英文名称：   plateler-derived growth factor AB   英文缩写：   PDGF-AB

血小板衍化生长因子-BB   英文名称：   plateler-derived growth factor BB   英文缩写：   PDGF-BB

程序性死亡因子1   英文名称：   programmed death 1   英文缩写：   PD1

旁分泌的方式分泌血小板源性生长因子受体β   英文名称：   Platelet-derived growth factor receptor beta   英文缩写：   PDGF Rβ

ZIM3蛋白抗体

5-三磷酸肌醇受体2抗体

CD14重组大鼠 CD14 蛋白 Protein

Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 间隙连接蛋白43(多肽片断抗原)

HNMT重组人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 标签) Protein

CCDC134 Protein Human 重组人 CCDC134 蛋白

CLEC6A Protein Mouse 重组小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白

Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 间隙连接蛋白43(多肽片断抗原)

CCDC134 Protein Human 重组人 CCDC134 蛋白

CD14重组大鼠 CD14 蛋白 Protein

CLEC6A Protein Mouse 重组小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白

HNMT重组人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 标签) Protein

小鼠子宫内膜干细胞小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA pcr检测试剂盒

Human ai parietal cell aibody (AGPA/PCA) ELISA Kit 人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)试剂盒

HumanProteoglycan,PGELISAKit 人蛋白聚糖(PG)pcr检测试剂盒分装

CLIAKitforACA-IgGELISAKit大鼠抗心0脂抗体IgG

耶尔森氏菌属(Yersinia)鉴定16SrDNAPCR扩增试剂盒20次

MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit小鼠骨保护素配体(OPGL)试剂盒规格：96T/48T