人子宫颈上皮细胞

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

人子宫颈上皮分离自子宫颈组织；子宫颈位于子宫下部，近似圆锥体，上端与子宫体相连，下端深入阴道。阴道顶端的穹隆又将子宫颈分为两部分：宫颈突入阴道的部分称宫颈阴道部，在阴道穹隆以上的部分称宫颈阴道上部。宫颈的中央为前后略扁的长梭性管腔，其上端通过宫颈内口与子宫腔相连，其下端通过宫颈外口开口于阴道。内外口之间即宫颈管。宫颈的大小与宫体比例随年龄及内分泌状态等而变化；宫颈壁由黏膜、肌层和外膜组成。子宫颈可有多种疾病，包括胚胎发育异常、炎症、瘤样病变、良性肿瘤、恶性肿瘤、损伤、宫颈性不孕、辅助生育技术、宫颈与性、宫颈妊娠等许多问题，体外培养的子宫颈上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

方法简介：

公司实验室分离的人子宫颈上皮采用胶原酶消化法，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人子宫颈上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠β-防御素(β-DF)试剂盒 ，英文名： β-DF ELISA Kit

Mouse thyroid stimulating hormone (TSH) ELISA Kit 小鼠促甲状腺素(TSH)试剂盒

ELISA 小鼠骨桥素(mouse OPN)  进口分装

CLIAKitforIL-10(HumanIerleukin10)ELISAKIT人白介素10

通用型美洲型猪繁殖和呼吸障碍综合征/蓝耳病(PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome;PRRS)试剂盒20次

ELISAKitVEGF-D大鼠血管内皮细胞生长因子D

小鼠牛小肠碱性0酸酶(CIAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

S100钙结合蛋白P抗体

小鼠三腺原酸(T3)试剂盒 96T/48T

People in morphine peptide -2 (EM-2) ELISA Kit 人内吗非肽-2(EM-2)试剂盒

Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISAKit 人淀粉样前体蛋白(βAPP)试剂盒 96T/48T 进口分装

GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEs试剂盒豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性荧光定量试剂盒20次

Mousec-junELISAKit小鼠c-jun试剂盒规格：96T/48T

c氧化酶IV亚型1抗体

IL13重组食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 Protein

myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP 0.5mgmyelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原

C1QBP重组人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 Protein

COMMD8 Protein Human 重组人 COMMD8 蛋白

HAVCR2 Protein Mouse 重组小鼠 TIM-3 / HAVCR2 蛋白

人子宫颈上皮细胞myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP 0.5mgmyelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原

COMMD8 Protein Human 重组人 COMMD8 蛋白

IL13重组食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 Protein

HAVCR2 Protein Mouse 重组小鼠 TIM-3 / HAVCR2 蛋白

C1QBP重组人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。