大鼠肺血管平滑肌细胞

细胞简介：

大鼠肺血管平滑肌分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素，新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应，并且与血管疾病的发展及稳定性有关。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肺血管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠肺血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠红细胞生成素受体(EPOR)试剂盒 ，英文名： EPOR ELISA Kit

Rabbit lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 兔淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)试剂盒

汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMouseCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeIcollagen,ICTPELISAKit小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽

体液环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量试剂盒20次

ELISAKit17-KS人17-同类固醇

猪血纤蛋白原试剂盒   猪血纤蛋白原试剂盒   规格型号：96T/48T   猪血纤蛋白原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪血纤蛋白原试剂盒、猪血纤蛋白原eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪血栓调节蛋白试剂盒   猪血栓调节蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   猪血栓调节蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪血栓调节蛋白试剂盒、猪血栓调节蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪血管性血友病因子试剂盒   猪血管性血友病因子试剂盒   规格型号：96T/48T   猪血管性血友病因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪血管性血友病因子试剂盒、猪血管性血友病因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪血管细胞粘附分子-1试剂盒   猪血管细胞粘附分子-1试剂盒   规格型号：96T/48T   猪血管细胞粘附分子-1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪血管细胞粘附分子-1试剂盒、猪血管细胞粘附分子-1eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Kelch样蛋白14抗体

猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 试剂盒

Human maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒

RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒 进口分装

CLIAKitforai-HAV(Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody)ELISAKit人抗甲型肝病毒IgM抗体

血液D-乳酸比色法定量试剂盒20次

PorcineHistamine,HISELISAKit猪组胺(HIS)试剂盒

细胞分裂周期蛋白25抗体

NA重组甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神经酶 (Neuraminidase / NA) (His 标签) Protein

phospho GAP-43(pSer41 0.5mgphospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神经生长相关蛋白43抗原

SETD8重组人 SETD8 / PR-Set7 蛋白 Protein

BIN2 Protein Human 重组人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 标签)

CNTN2 Protein Human 重组人 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 标签)

大鼠肺血管平滑肌细胞phospho GAP-43(pSer41 0.5mgphospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神经生长相关蛋白43抗原

BIN2 Protein Human 重组人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 标签)

NA重组甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神经酶 (Neuraminidase / NA) (His 标签) Protein

CNTN2 Protein Human 重组人 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 标签)

SETD8重组人 SETD8 / PR-Set7 蛋白 Protein