伤寒杆菌抗体检测试剂盒

伤寒杆菌抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

伤寒杆菌抗体检测试剂盒

使  用  说  明（96T/48T）

[原理]

本试剂盒采用亲和素-化St-抗原（以“O”、“H”为主）预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的St- IgM 抗体，并配以酶标记抗人IgMu链单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。

[用途]

  本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的伤寒杆菌（St）IgM抗体，对伤寒沙属菌早期感染的诊断有重要的价值，比肥达氏反应灵敏、特异、简便。

[试剂盒组成]

1、化抗原预包被板      1块（8X12/4X12）  2、阴性对照                  1瓶（不稀释）

3、阳性对照                 1瓶（不稀释）

4、标本稀释液                1瓶（20 ml/10ml，）

5、酶结合物                 1瓶（12/5ml）

6、30X浓缩洗液              

1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）

7、显示剂A、B液            各1瓶（5/3ml）

8、终止液（2M H₂SO₄）       1瓶（5/3ml）

9、说明书                    1份

[操作步骤]

1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。用蒸馏水将浓缩洗涤液1:30稀释待用。

2、加样：按1：101稀释待检标本（如：5ul---500ul标本稀释液），于各反应板孔中加入100ul已稀释待检标本（或板孔内稀释：各反应孔中加入100ul标本稀释液，然后加入1ul各待检标本，并混匀）。设阴阳性对照（100ul/孔，不稀释）各一孔，空白对照一孔（加100ul标本稀释液），轻拍混匀。

3、孵育：37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满（或300ul）洗涤液连续洗板3次每次在吸水纸上拍干。

4、加酶结合物：每孔2滴（或100ul），混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。

5、显色：每孔加显色剂A、B各一滴（或各50ul），轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。

[结果判断]

1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者    为阳性，无色者为阴性。

2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm   下测定各孔O.D值。

① P/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。        

② P/N≥2.1为阳性；

③ 1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴性。

④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置  室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。

2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4. 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。

6. 最用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。

7. 本试剂盒标本稀释液中含有抗干扰因子，可彻消除聚合人IgG或RF所致假阳性。