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产品名称:髓过氧化物酶MPO测试盒
产品规格:100 管 48 样
储存条件:4℃
有效期:6 个月
测定原理:
中性白细胞中存在有髓过氧化物酶,每个细胞所含的酶的量是一定的,约占细胞干重的 5%,该酶具有使过氧化氢还原的能力,利用这一特点可以分析酶的活力,并定量测定中 性白细胞的数目。其原理如下: MPO+H2O2 复合物; 复合物+AH2(供氢体) H2O+MPO+A 产物 通过供氢体邻连茴香胺供氢后生成黄色化合物,在 460nm 处通过比色测定 A 产物的生 成量,从而推算出 MPO 的活力及 H2O2 减少的量和白细胞的数目。
试剂组成与配制:(100 管/48 样)
试剂一:缓冲贮备液 35mL×1 瓶,按需要量配成缓冲应用液,4℃可保存 6 个月。缓冲 应用液的配制:贮备液:双蒸水=1:9,4℃可保存 1 个月。
试剂二:粉剂×2 支,4℃可保存 6 个月。临用时每支加缓冲应用液 60mL 溶解,可以 37℃加热溶解, 4℃可保存 2 周。[注]:若您所需测的是组织样本,并且除髓过氧化物 酶之外,还需测其它项目时,此时每支试剂二粉剂需配成浓缩一倍的溶液,即每支试剂 二粉剂加到缓冲应用液 30mL 中。
试剂三:粉剂×3 支,溶剂 6mL×3 支,4℃可保存 6 个月。用时 1 支粉剂倒入 1 支溶 剂中溶解,最好提前一天配制,充分溶解后 4℃可保存 2 周。
试剂四:溶液 24mL×1 瓶,天冷时会凝固,用前放入 37℃以上的水中摇晃使其溶解至 透明后方可应用,室温可保存 6 个月。
试剂五:粉剂×2 支, 4℃可保存 6 个月。
试剂六:溶液 0.5mL×1 支,4℃可保存 6 个月。 显色剂的配制:临用时将试剂五粉剂 1 支加到 100mL 缓冲应用液中,充分摇匀,待粉 剂完-全溶解后再加入 试剂六 0.1mL,充分混匀,配好后的显色剂 4℃避光保存(颜色变深红后弃用)。
试剂七:溶液 6mL×1 瓶,4℃可保存 6 个月。
组织样本的 MPO 测定:
(一)、样本前处理:准确称取组织重量,以配好的试剂二溶液为匀浆介质,按重量体 积比为 1︰19 加匀浆介质制备成 5%的组织匀浆(也可酌情制备成 10%的匀浆),不需要进仅供科研实验使用 行离心。(组织匀浆尽量均匀,不要有大块组织存在) [注]:若您除做髓过氧化物酶之外,还需测其它指标时,则组织匀浆制备要按下面方法: ①、试剂二配制时要浓缩一倍,即每支试剂二粉剂加到 30mL 缓冲应用液中; ②、先用生理盐水为匀浆介质按实验方法学制成浓缩一倍的匀浆,即 10%匀浆(脑组织 制备成 20%匀浆),不要离心,取出部分浓缩一倍匀浆按 1︰1 比例加入浓缩一倍的试 剂二溶液,混匀后再进行测定。
注意事项:
1、天冷时,反应液会出现凝固状态,吸光度上升,您可以用 25~37℃的水浴箱或取一 个盛 25~37℃热水的烧杯放在比色机旁边,将各待测管依次放入水浴箱或烧杯中 1~2 分钟,待凝固消失后即可进行比色。
2、混匀时,最好用旋涡混匀器,使液体上下充分混匀(一定要使最下面液体也能旋转 到上面,建议不要用尖底的管子做,尤其不可用 1.5mL 的 EP 管,因为这样非常难混匀)
髓过氧化物酶MPO测试盒