血球计数板5

血球计数板

，是指—种常见的生物学工具。用以对人体内红、白细胞进行显微计数，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母菌等微生物的数量。是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个凹槽，构成三个平台。中间的较宽平台被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，的一大格作为计数用，称为计数区。

计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。

注意事项：

1.镜检计数室。因前一次清洗不到位，或者保存过程中存在污染，更或者因操作不当导致的计数室存在划痕，若不及时清洗或更换，则会对后期实验计数产生极大影响。所以，在每次使用血球计数板之前都需要加一步镜检计数室，如若在镜检时发现计数室有污物，则需按要求清洗并吹干后再进行实验。

2. 摇匀后取液。在吸出培养液进行计数之前，需轻轻震荡试管，使菌体分布均匀，防止聚沉淀，从而提高计数的代表性和准确性。

3. 先盖血盖片后加菌液。在菌悬液摇匀后，应先在血球计数板上盖上血盖片，再用滴管吸取少许菌悬液，从计数区中间平台沿血盖片的上边缘滴入一小滴菌悬液，利用液体的表面张力一次性充满计数区。若先加菌液再覆盖血盖片，则容易因为菌液加入过多，而导致血盖片未与血球计数板支持柱接触，血盖片浮于菌液上方而导致计数偏大，同时会因为有气泡产生而导致计数偏小。

4. 静置片刻再计数。静置5 min，待菌悬液不再漂浮流动，酵母菌全部沉降后再将血球计数板放到显微镜下进行计数。先在低倍镜下找到需要观察计数的大方格及中方格，将中方格移到视野，然后拨动转换器移至高倍镜进行计数。

5. 高倍镜下调亮度。低倍镜下，用平面镜和小光圈，可以清晰地看到血球计数板上的酵母菌。但是，拨动转换器换到高倍镜后，即使是用了平面镜和小光圈，视野里往往还是白茫茫一片，什么都看不见，这时候可以尝试操作遮光器上的金属遮光片进行遮光处理。因为活的酵母菌和培养液的折光率相近，所以要在高倍镜下将视野调得暗一些。

6.掌握计数原则。一般选择观察的菌液浓度控制在每个小方格内有4或5个菌体为宜，若其浓度太高，可适当稀释；并采用“计上不计下，计左不计右”的计数原则。