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绵羊抗人α1AT(α1抗胰蛋白酶)血清:α1-抗胰蛋白酶是一种糖蛋白。含糖10%-20%,主要由肝脏合成。分子量51.8kDa,体内半衰期5.6天,在常规蛋白电泳上为α1-球蛋白的最主要成分。其生物学作用在于抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、透明质酸酶、纤溶酶、弹力蛋白酶等,对凝血酶、尿激酶等其他酶也有抑制作用,是一种广谱蛋白酶抑制剂。
宿主:绵羊
成分:抗血清、防腐剂
纯度:免疫电泳法检测,呈单一沉淀线
稳定性:液体-20℃保存2年(避免反复冻融)
应用范围:酶标试剂、免疫比浊试剂、免疫胶乳试剂生产、提取纯化抗体、组化实验中对应抗原,或封闭对应杂抗体,测定对应抗原浓度,或抗原夹芯法测定对应抗体,吸收杂抗原成分,层析纯化抗原,分析与鉴定对应抗原成分,封闭交叉抗原,测定对应抗原成分,测定抗原纯度等。
除去杂抗体有两种方法:
1.亲和层析法将交叉杂抗原交联到琼脂糖珠4B上,如除去抗白蛋白抗体,则交联上白蛋白或不含甲胎蛋白的血清,装柱后,将预吸收的抗体通过亲和层析柱,杂抗体吸附在柱上,流出液则是单价特异性抗体。
2.吸附剂方法用不含特异性抗原的抗原液,即不含用于免疫动物抗原的其他杂抗原液,如血清、组织液或已知的某种杂抗原,用双功能试剂将其交联,做成固相吸附剂。如用不含甲胎蛋白的血清,稀释1倍后,加入0.25%的戊二醛或丙酮醛,放冰箱一夜后,该血清成为胶冻状,用力打碎(或用组织粉碎器),用缓冲液多次洗涤后,则成为颗粒状的凝胶吸附剂。用这种吸附剂直接加到抗血清中(约1/10),抗原则与杂抗体结合,上清液则为无杂抗体的单价特异性抗体。有时因杂抗体太多,必须处理吸收两次才能完全去除。吸附过的凝胶,用3mol/L硫氰酸钾(或钠)洗涤,洗脱掉杂抗体,可再继续使用。
有时杂抗原较少,其他蛋白也少,加入戊二醛后不形成胶冻状,此时可加入无关蛋白进行交联,如牛血清蛋白、兔血清、马血清、卵白蛋白等。加入量以达到含总蛋白的2%~3%为宜。
绵羊抗人α1AT(α1抗胰蛋白酶)血清