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绵羊抗人B因子血清:免疫血清 immune serum亦称抗血清。含有抗体的血清制剂。种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。
宿主:绵羊
成分:抗血清、防腐剂
纯度:免疫电泳法检测,呈单一沉淀线
稳定性:液体-20℃保存2年(避免反复冻融)
应用范围:酶标试剂、免疫比浊试剂、免疫胶乳试剂生产、提取纯化抗体、组化实验中对应抗原,或封闭对应杂抗体,测定对应抗原浓度,或抗原夹芯法测定对应抗体,吸收杂抗原成分,层析纯化抗原,分析与鉴定对应抗原成分,封闭交叉抗原,测定对应抗原成分,测定抗原纯度等。
注意事项:
1.液体抗血清保存原则:避免反复冻融
2.短期保存的抗血清:2-8℃短暂保存数周对活性没有影响。
3.长期保存的抗体:建议收到后分装于-20℃保存。
特异性IgG抗体的制备
在标记的免疫测定或其他技术中将特异性抗体纯化出来,是极为重要的。例如在ELISA,用于包被的抗体一定要用特异性IgG,才能得到良好的效果。这是因为全血清中有大量非抗体蛋白,如白蛋白、α1和α2球蛋白等,如不除去,会干扰包被。再如反相间接血凝,致敏红细胞的抗体也需用特异性IgG的I(ab')2才能使实验满意。特异性IgG和F(ab')2的制备方法有如下几种。
(一)粗提法提取球蛋白
大多用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。硫酸铵盐析须经过多次沉淀,第一次用40%饱和度,第二次用35%饱和度,第三次用33%饱和度,经三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸钠法更简便,用20%即可将γ球蛋白沉淀出来。经盐析后的γ球蛋白虽大多属于IgG,但还有5%其他区带蛋白,如γ区的杂蛋白。又因IgG组分中还含其他所谓正常的IgG,产生干扰。因此盐析法粗提的γ球蛋白只能用于一般的实验,或者是抗体效价较高的抗血清。
(二)离子交换层析法提取IgG
常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素,以QAE-Sephadex最为理想,DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸盐缓冲液中平衡,将水分抽干,称湿重Ig加于10ml血清中,在室温30min后,离心或过滤除去离子交换剂。上清液再如此处理一次,即获得较纯的IgG,甚至不含其他杂蛋白。用该技术纯化IgG简便,不损坏抗体,既可小量提取,也可大量制备。
绵羊抗人B因子血清