BAI细胞壁不溶性酸性转化酶可见分光光度法

商品介绍：

测定意义

蔗糖转化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据最适 pH，Ivr分为酸性转化酶（AI）和中性转化酶（NI）两种类型。                          

AI的最适pH为3～5。AI分为可溶性AI(S-AI)和细胞壁不溶性AI（B-AI）两种类型。B-AI存在于细胞间隙并结合在细胞壁上，主要参与韧皮部质外体卸载时蔗糖的分解，以维持库源之间蔗糖的浓度。

测定原理：

B-AI催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范围内510nm光吸收增加速率与B-AI活性成正比。

自备用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、
产品属性：

产品内容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

注意事项：

1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。

下列是公司正在热销的产品：

兔促肾上腺皮质(ACTH)试剂盒 Anti-HSPB8 Antibody端粒相关蛋白1抗体

兔胆乙酰化(CHAc)试剂盒  Anti-HSPB6 Antibody谷酰转3抗体

兔脂联(ADP/Acrp30)试剂盒Anti-HSPD1 Antibody环指蛋白92抗体

兔核糖核抑制因子(RI)试剂盒Anti-HSPE1 Antibody环指蛋白调节蛋白激C蛋白抗体

兔成纤维生长因子9(FGF9)试剂盒Anti-HSPBAP1 AntibodyTRIM50蛋白抗体

兔谷脱羧1(GAD1)试剂盒Anti-HSPG2 Antibody环指蛋白88抗体

兔血红氧化2(HO2)试剂盒 Anti-HSPD1 Antibody(PB0301)锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体

兔B因子(BF)试剂盒  Anti-HSPH1 Antibody环指蛋白98抗体

兔多配体聚糖3(SDC3)试剂盒Anti-HSPG2 Antibody(PB0302)环指蛋白16抗体

兔周期D3(CCND3)试剂盒 Anti-HTR2A Antibody环指蛋白105抗体

兔前列腺E受体3(EP3)试剂盒Anti-HTR1A Antibody环指蛋白125抗体

兔CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)试剂盒 Anti-HSPH1 Antibody凝血(II)重链抗体

兔TATA框结合蛋白相关因子13(TAF13)试剂盒Anti-HTR3A Antibody转移生长因子β受体3抗体（TGF-βRⅢ，TGFβRⅢ）

兔载脂蛋白C3(ApoC3)试剂盒 Anti-HTRA3 Antibody辣椒受体抗体

兔叉头框蛋白P1(FOXP1)试剂盒Anti-HTR2B Antibody肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体
BAI细胞壁不溶性酸性转化酶可见分光光度法氧化镝 ≥99.9% metals basis3,5-二氟甲 98%Human Protein S ELISA Kit  人蛋白S

氧化铒 99.99%4-氟-3-硝基三氟甲 99%sEPCR(Human soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit  人可溶性血管内皮蛋白C受体

氧化铒 99.9% metals basis5-氟-2-硝 97%C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit  人CCAAT增强子结合蛋白ε

氧化铕 99.9% metals basis2,4-二甲基吡 97%C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit  人CCAAT增强子结合蛋白δ

氧化钬 99.99% metals basis4-基三氟甲 98%C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit  人CCAAT增强子结合蛋白α

纳米氧化钬 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)3,5-二基三氟甲 98%2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit  人2,3-二磷甘油

氧化镥  99.99% metals basis苄基三基溴化膦 98%LUM(Human lumican) ELISA Kit  人基膜聚糖/内腔蛋白

碳镧(III) 水合物 99%丁基三基氯化膦 98%NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit  人Na+/H+交换体3