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天狼猩红染色实验代测
天狼星红与其衬染液都是强酸性染料,易于胶原分子中的碱性集团集合,吸附牢固。偏振光镜检查,胶原纤维有正的单轴双折射光的属性,与天狼星红复合染色液结合后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。
服务说明
天狼猩红染色实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
2、天狼猩红染色液染色:切片入饱和枯萎蒜天狼猩红染色液内染色8min。
3、漂洗:切片入*漂洗数分钟,显微镜下观察满意为止。
4、封片:切片于60°烤箱烤干后于二甲苯透明5min,中性树胶封片。
5、显微镜镜检,图像采集分析。
染色结果:光学显微镜下胶原纤维红色,背景黄色。
注意事项
1、染液配制时,饱和枯萎蒜一定要过饱和,配制时要长时间搅拌后还有不溶的情况下才为饱和的。
2、饱和天狼猩红染液是一种两色混合染液,两种颜色同时都有作色能力,而且存在一定得制约平衡关系,所以染液在长期使用时随着带入的杂质过多,可能会影响这种平衡关系,所以建议染色结果不对时,应立即更换染液。
3、天狼猩红染色前,需要尽量将水甩干,避免多次染色后带入较多的水分使染液的染色能力下降。
4、染色后脱水时使用新的无水乙醇,并快速脱水,长时间脱水会影响染色结果。
5、如果需要染核,可以先染完天狼猩红后在用苏木素染核。