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致病性大肠杆菌（EPEC）核酸检测试剂盒说明书
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上海博湖生物科技有限公司Shanghai Bohu Biotechnology Co., Ltd是一家生物*，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的、销售。并代理销售Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE IBL Amresco等二十多家国外，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。公司主营产品：ELISA 试剂盒，ELISA免费代测，中国标准品，生化试剂，科研抗体，美国ATCC细胞株，生物培养基等产品经营.上海博湖生物科技有限公司先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学，暨南大学，南京工业大学，曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒，种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒；另有针对各种动物（鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼）的科研试剂。公司秉承“专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务，力求为我国科研事业更好的，更专业的服务！公司售后服务宗旨:有质量问题可申请退换，有技术疑问可随时给于解答，一对一的客服服务，客户的需求也是我们不断的更新服务。
详细信息
产品名称：致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒说明书
规格：48T/盒
编号：BH-P4760
分类：荧光-PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
规格及成分：
产品名称成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT（末端转移酶） 120312 10 μL
2×TdT Buffer（含 dATP） 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0（含染料） 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器*的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，大吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的大吸收光谱在 500nm，大发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
HL-60(人早幼粒急性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2甲基纤维素(100000mPa.s)质量规格：粘度100000mPa.sMethyl cellulose
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1036甲基纤维素(4000 mPa.s)质量规格：4000mPa.s,BRMethyl cellulose, middle viscosity
人淋巴成纤维细胞 (HLF)( 5×105 )丽春红4R,新胭脂红,亮丽春红5R,酸性红18质量规格：BSBrilliant ponceau 5R
CL-0423RIN-m5f(大鼠胰岛β细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2酚藏花红质量规格：>80%Phenosafranine
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC 大鼠冠状动脉平滑肌细胞*培养基 100mL天狼星玫红，BB质量规格：ARSirius Rose BB
大鼠颗粒细胞(RGC)(1×106) U-2 OS, 人骨肉瘤细胞 Human*Fosinopril sodium质量规格：度≥99.0%（HPLC）
人胚肺二倍体细胞;2BS*（速尿）Furosemide质量规格：>99%,BR
IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) *（标准品）Furosemide质量规格：含量测定
人肾动脉平滑肌细胞*培养基 100mL*Gemfibrozil质量规格：>99%,USP,可用于细胞培养
F9细胞，小鼠畸胎瘤细胞 A549 [A-549](肺癌细胞) 人癌细胞;MDA-MB-453*（标准品）Gemfibrozil质量规格：含量测定
致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒说明书CaEs-17 人食管癌细胞铝丝，英文名或英文缩写：Aluminum，级别：AR，99%，规格：50毫克
GBC-SD人胆囊癌细胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcinomas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS加醋务酯 cMYL FORMcTq 638-49-3
LEFTY2 Protein Human 重组人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 标签)DL-氢录赖酸，英文名或英文缩写：DL-Lysine monoxy7nochloride，级别：BR，99%，规格：100克
人肝内胆管上皮细胞 (HIBEC)( 5×105 ) HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 Rattus新生霉素钠，英文名或英文缩写：Novobiocin wo7ium Salt，级别：BR，95%，规格：500毫克
C57BL/6小鼠T细胞淋巴瘤细胞;RMA138-52-3水杨苷2-(xy7noxymetxyl)pxenyl-beta-D-glucopyranoside
注意事项：
①加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
